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NEWS别只关注台盼蓝,这5种测细胞活率的精准方法,来自不朽情缘MG!
来源:翟文姬 日期:2025-03-24在生命科学研究和生物医学应用中,细胞活率的评估至关重要。无论是在细胞培养、药物筛选,还是细胞疗法产品的质量控制中,准确评估细胞的活性都是实验成功的关键因素。提到细胞活率检测,传统的台盼蓝染色法常被首先想到。这一方法操作简单、成本低廉,成为实验室中的“必备”工具。
然而,台盼蓝染色法并非完美之选。该方法只能检测细胞膜的完整性,而无法反映细胞的代谢状态。同时,台盼蓝本身对细胞有一定的毒性,长时间染色可能影响细胞活性,且在操作时容易产生误差。因此,除了台盼蓝,我们还可以采用其他一些方法,以更全面、准确地鉴定细胞活率。以下将介绍四种常用的细胞活率检测技术,并分析它们的优缺点,旨在帮助科研人员根据实验需求选择合适的方法。
CCK-8(Cell Counting Kit-8,细胞计数试剂)包含WST–8,这是一种水溶性染料,能够被活细胞线粒体内的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜产物。通过测定甲臜的吸光度,可以间接反映细胞活率和增殖能力。
优点:灵敏度高,适合高通量筛选,能够反映细胞的代谢活性。
不足:需要特定的仪器(如酶标仪)来测定吸光度,操作步骤较多,耗时较长。
此方法利用荧光染料(如PI碘化丙啶、Calcein-AM)标记细胞。PI只能进入死细胞并与DNA结合发出红色荧光,而Calcein-AM则通过活细胞代谢后发出绿色荧光。结合荧光显微镜或流式细胞仪检测,可以区分活细胞和死细胞。
优点:灵敏度高,结果准确,适合复杂样本的检测。
不足:需要昂贵的仪器,且操作较为复杂,适合有经验的实验人员。
该方法检测细胞内ATP(三磷酸腺苷)的含量。活细胞中的ATP含量较高,而死细胞的ATP含量极低。通过这种方法,可以间接评估细胞活率。
优点:灵敏度极高,结果快速,适合高通量筛选,能够反映细胞的代谢状态。
不足:需特定试剂盒和仪器,成本较高,对样本处理要求较高。
克隆形成实验用于评估细胞的增殖能力和对杀灭因素的敏感性。在此实验中,细胞克隆形成率即细胞接种后的存活率是重要指标。当单个细胞在体外增殖超过6代时形成的群体被称为克隆,通常,每个克隆包含50个或更多细胞。通过计算克隆形成率,可以定量分析单个细胞的增殖潜力。
优点:能够反映细胞群体的生长依赖性与增殖能力。
不足:并非所有贴壁细胞均能增殖,且实验方法较为复杂。
不朽情缘MG承载着生命科学的前沿探索,提供多种细胞活率检测方法,让您的实验之旅更加顺畅。选择合适的检测方法对于实验的成功至关重要。每种方法都有其独特的优势和局限性,因此在实际应用中需根据实验需求、设备条件及样本特性灵活选择,确保研究的精准与有效。您在实验中更倾向于使用哪种方法呢?欢迎在评论区分享您的经验!
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