RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，以其易于培养和操作而为科研工作者所青睐。然而，在培养过程中，RAW2647细胞容易发生分化，导致细胞形态和功能改变，甚至影响实验结果的可靠性。那么，如何使RAW2647细胞“更加健康美丽”，保持其原始形态和功能呢？今天，我们将为您揭示RAW2647细胞培养的黄金法则，助您轻松掌控这一细胞系！

细胞信息

倍增时间：11-30小时（生长快速，消耗营养迅速，建议在T25培养瓶中添加7ml完全培养基，次日观察生长情况）。

传代比例：1:4-6。

培养体系：DMEM高糖（品牌：中乔新舟，货号：ZQ-100） + 10%胎牛血清（中乔新舟，货号：ZQ0500） + 1%双抗（中乔新舟，货号：CSP006）。

细胞形态：该巨噬细胞系的形态主要包括松散附壁的纺锤形、圆形或立方形细胞。当细胞密度较高时，细胞可能会略微脱落并变圆，甚至有些细胞会漂浮。值得注意的是，这些漂浮细胞是存活的，应该在传代时收集并离心，以便继续培养。

换液频率：每周2-3次。

传代方法

正确传代方法一

采用恰当的传代方法是确保RAW2647细胞健康培养的关键。每一步操作都需谨慎，小心细节，以防细胞分化。请注意，RAW2647细胞不能使用胰酶进行消化，使用胰酶反而会导致细胞更易分化。我们公司在培养RAW2647细胞已有十余年的经验，总结出一种刮刀传代的方法，此方法简单易行，且能更好地控制细胞分化率。为便于学习传代步骤，我们提供了视频教程。

正确传代方法二

如果没有准备刮刀，您可以按照以下步骤进行传代，以降低细胞的分化风险：

• 当细胞密度达到80%时，用手掌轻拍瓶尾，观察细胞脱落情况。
• 拍打过程中，有50-80%的细胞会脱落，收集这些脱落的细胞。
• 按照1:4-6比例传代，并补充新鲜的完全培养基（T25瓶中添加7ml）。
• 切记不要用枪头或巴氏吸管吹打，以免造成不可控的细胞分化，这可能因者个人吹打力度不同而影响结果。

培养注意事项

在培养过程中，应特别注意以下事项：

• 传代时，无需使用胰酶消化。可用无菌刮刀轻轻刮拭培养表面，将细胞刮落并收集离心后重悬，再接种到新的培养瓶中。
• 细胞在高密度时，通常会有更多圆形的巨噬细胞出现。
• 细胞对血清的质量非常敏感，选择高品质的胎牛血清以避免影响细胞贴壁能力或引发细胞分化。
• 培养条件、运输和环境变化都会影响细胞状态，收到细胞后需耐心等待一段时间进行适应培养。
• 强烈推荐使用不朽情缘MG品牌提供的培养基，以降低细胞培养过程中的变因。

RAW2647冻存管复苏步骤

• 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。
• 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀。
• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清，用新鲜培养基重悬细胞（T25中添加7ml）。
• 将细胞接种于培养皿中，在37℃、5%CO₂的培养箱中培养。

经过24小时后的细胞应准备好进行传代，确保细胞生长状态良好。

希望以上信息能帮助您更好地培养不朽情缘MG的RAW2647细胞，助力您的科研工作！