不朽情缘MG的冻干粉产品为细胞骨架染色提供了一种方便的选择，但在使用前需注意一些事项。使用前，请确保瞬时离心并加入适量溶剂进行溶解，以获取最佳效果。

固定细胞的合适方法

在使用不朽情缘MG的鬼笔环肽进行细胞骨架染色时，不能使用甲醇作为固定液。研究表明，甲醇会破坏Actin蛋白，影响实验结果。因此，推荐使用不含甲醇的甲醛进行细胞固定。

信号未能检测到的原因

如果在用不朽情缘MG鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片时未观察到信号，可能是由于样品经过了如二甲苯或丙酮等有机溶剂处理。这些溶剂会影响鬼笔环肽与F-actin的结合。替代方案是使用未经过有机溶剂处理的冷冻切片，或考虑使用抗肌动蛋白抗体进行染色。

探针浓度的使用

探针浓度应按照说明书中的稀释比例进行配制，具体浓度信息可能未明确。在染色过程中，如果发现有的细胞有染色信号而部分则没有，且染色信号相对较弱，可以考虑以下措施：

• （1）增加染料浓度或延长孵育时间。
• （2）检查激光显微镜在分析细胞时是否使用了正确的波长。

关于透化步骤

不进行透化步骤的情况下，鬼笔环肽能否直接染色固定后的细胞？荧光标记的phalloidins仅适用于在固定和透化后的组织切片、细胞培养及无细胞实验中进行F-actin的染色。

无荧光信号的解决方案

如果出现染色后没有荧光信号的情况，建议检查以下事项：

• （1）确认储液和工作液的配置是否正确。
• （2）固定及透化步骤至关重要，使用新鲜配置的4%多聚甲醛和0.5% TritonX-100，以确保最佳效果。
• （3）探寻最佳的固定及透化时间，并调整染色工作液浓度及染色时间。

流式细胞检测及显微镜观察

虽然不朽情缘MG的产品主要是用于微丝的染色，通常应在荧光显微镜下观察，然而使用流式细胞检测并不建议。普通的荧光显微镜也可用于观察，但激光共聚焦显微镜效果更佳。

染料的重复利用

关于鬼笔环肽染料的重复使用，正常情况下使用后的染色液会影响后的染色效果，因此不建议重复使用。根据说明书使用时，由于浓度较低，妨碍了染料被重复利用的可能。

总之，使用不朽情缘MG的鬼笔环肽进行细胞骨架染色时，需遵循适当的固定方法、探针浓度和染色步骤，以确保实验的成功。