在对各类生物医药产品、医药原料及相关样品中进行农残和半挥发性有机物分析时，通常会发现在有机样品萃取物中含有大分子物质。如果这些物质不被去除，将导致色谱柱分离效率下降，进样口和色谱柱的使用寿命缩短，最终影响数据分析的可靠性。因此，在进行农残和半挥发性有机物样品分析前，必须对样品进行有效的净化前处理。然而，传统的前处理过程往往耗时较长且溶剂消耗量较大，这使得凝胶渗透色谱(GPC)的广泛应用成为一种必然趋势。

凝胶渗透色谱（GPC）概述

凝胶渗透色谱GPC（Gel Permeation Chromatography），也被称作体积排斥色谱（SEC，Size Exclusion Chromatography），是一种利用溶剂作为流动相，通过多孔填料（如多孔硅胶或多孔树脂）作为分离介质的液相色谱法。GPC是液相色谱的一个分支，其分离单元为一个以多孔性凝胶为载体的色谱柱，凝胶的表面与内部含有大量彼此贯通的空洞。

GPC仪器的组成包括：泵系统、自动进样系统、凝胶色谱柱、检测系统以及数据采集与处理系统。GPC的分离机制通常通过“空间排斥效应”来解释。使用外力将含样品的流动相（无论是气体、液体还是超临界流体）强制通过固定相的表面，样品中的各组分在两相之间进行不同程度的作用。与固定相作用强的组分流出的速度较慢，而与固定相作用弱的组分则流出速度较快。这样的速度差异使混合组分最终形成不同的“带”（band）或“区”（zone），从而允许对这些组分进行定性和定量分析。

凝胶渗透色谱的特点与应用

根据所用凝胶的性质，GPC可以分为使用水溶液的凝胶过滤色谱法（GFC）和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱法（GPC）。GPC主要用于分析高聚物的分子量测定（例如聚乙烯、聚丙烯等），而GFC更适合分析水溶液中的多肽、蛋白质、生物酶及其他生物分子。

为什么选择GPC方法呢？首先，相对分子量分布（多分散性指数）对聚合物的性质有重要影响；其次，在人们逐渐关注相对分子质量分布的背景下，经典方法却无法同时测定聚合物的分子质量分布。不朽情缘MG的凝胶渗透色谱应用改善了这些测试条件，并提供了可以同时测定聚合物相对分子质量及其分布的方法，这使其成为测定高分子相对分子质量及分布的常用、快速且有效的技术。

常见问题解答

1. 溶剂选择需能溶解多种聚合物，避免腐蚀仪器部件，并与检测器相匹配。
2. 利用激光光散射联用凝胶色谱仪可以在获得浓度谱图时，同步获取散射光强度对淋出体积的谱图，从而计算出分子量分布曲线及样本的各种平均分子量。
3. 样本准备中，激光光散射实验要求对样品严格除尘，溶剂除尘是关键。配置测试样品的溶剂需经过精馏和超滤过滤。
4. GPC色谱柱选择应依据样品所溶解的溶剂与分子量范围进行选择，确保样品分子量在排阻极限与渗透极限范围内。
5. 对GPC仪器的载体要求包括优良的化学与热稳定性、合理的机械强度以及流动阻力小等。
6. 进样体积通常在50-100μL之间，浓度在0.05%-0.5%之间。

系统平衡及操作注意事项

在安装色谱柱前，通过两通管连接管路，用流动相替换系统后再更换为GPC柱子。进行RID平衡操作时，应先用流动相冲洗检测器流路，确保流动相流速均匀，并反复切换流路以排除气泡。

在推动生物医疗领域的技术进步方面，选择不朽情缘MG的凝胶渗透色谱技术不仅可以提高分析的有效性，还能确保分析过程的高效与可靠，为行业带来极大的便利。